Séminaire externe - Ludovic Galas, HeRacLeS - Inserm / Université de Rouen

### Communication intercellulaire via les nanotubes tunnel (TNT) : enjeux en cancérologie et développement Depuis leur première description en 2004 (Rustom _et al._, 2004), les biologistes cellulaires portent un intérêt croissant à la communication intercellulaire via les **nanotubes membranaires ou « Tunneling NanoTubes (TNT ) »**. Ainsi, il a été démontré que les TNT relient de nombreuses lignées cellulaires ainsi que des cellules primaires (Cordero Cervantes & Zurzolo, 2021). Des modèles biologiques complémentaires, incluant les co-cultures et les cultures 3D, ont également révélé la diversité des TNT, notamment l’existence de **homo-TNT** (entre cellules de même type) et d’**hétéro-TNT** (entre cellules de types différents) (Pasquier _et al._, 2012, 2013 ; Dubois _et al._, 2018 ; Dagar _et al._, 2021 ; Saha _et al._, 2022). Des caractérisations structurales et fonctionnelles des TNT ont été réalisées grâce à la microscopie électronique et à des techniques avancées de microscopie photonique (Dubois _et al._, 2020). Pour comprendre pleinement les mécanismes de formation des TNT ainsi que les processus de transfert intercellulaire (Sharma & Subramaniam, 2019 ; Dubois _et al._, 2021), une étude détaillée des TNT dans des cellules vivantes s’avère indispensable. Cependant, l’imagerie de cellules vivantes soulève des défis techniques en raison de la finesse, de la photosensibilité et de la fragilité des TNT, ce qui rend difficile l’utilisation de méthodes potentiellement dommageables (Bénard _et al._, 2015 ; Dubois _et al._, 2020). Nous avons donc considéré le quatuor « **échantillon** », « **sonde** », « **instrument** » et « **traitement d’image** » comme une ligne directrice efficace pour obtenir des résolutions adaptées à l’imagerie de fluorescence de cellules vivantes. Par conséquent, nous avons mis en œuvre des stratégies sophistiquées utilisant des sondes fluorescentes rouges/proches infrarouges et combiné les approches **FLIM**, confocale et **STED** pour révéler les TNT dans des cellules cancéreuses vivantes (Bénard _et al._, 2021, 2024, 2025). En plus des cellules en culture, nous avons également décrit l’existence de TNT au sein de la rétine ex vivo. Chez la plupart des mammifères, un réseau vasculaire postnatal entièrement nouveau se forme pour alimenter métaboliquement la rétine interne préexistante. Toutefois, le développement spatio-temporel des plexus vasculaires reste peu étudié en raison de limitations technologiques. Notre stratégie a consisté à proposer un **workflow robuste d’imagerie d’organe vivant multi-échelle** afin de révéler la richesse des processus d’**angiogenèse rétinienne**, incluant les homo-TNT entre cellules endothéliales. Contact : [**Marc Tramier**](https://igdr.univ-rennes.fr/marc-tramier)